微生物與人類 / 子課題
無菌技術
Aseptic Technique
無菌操作的原理和注意事項；風險評估；滅菌（高壓蒸汽/乾熱/輻射/化學）與消毒的區別
核心考點 (Knowledge Groups)
1. 比較滅菌、消毒及無菌技術的原理
考評提示：滅菌vs消毒的區別
- 考評重點 滅菌與消毒的區別：滅菌 (sterilisation) 指殺滅所有微生物 (包括內生孢子)，常用方法為高壓蒸汽滅菌器 (autoclave，121°C、15 分鐘)；消毒 (disinfection) 僅把大部分病原微生物殺滅至安全水平，不一定能殺滅內生孢子，常用消毒劑如酒精、碘酒等
- 邏輯 無菌技術有兩項同等重要的目的：一是防止外界微生物污染培養物，以確保實驗結果準確；二是防止培養物中的微生物釋出至環境而危害健康或污染環境 (生物安全)；兩者均需透過規範操作達成
- trap 培養皿應倒置培養：倒置能防止培養過程中蓋上冷凝形成的水珠滴回瓊脂表面，避免造成菌落融合或外來污染；原因並非單純與重力有關，考生不可只答「防止滴水」而不指出後果
常見題型 · scoring points
描述無菌技術的目的和操作程序
- 目的：防止外界污染物進入培養物；防止微生物散播到環境。
- 操作：接種環灼燒至紅熱；在酒精燈旁開蓋（熱氣流阻隔）；培養皿倒置培養。
- 滅菌：殺滅所有微生物（包括芽孢）；消毒：殺滅大部分病原微生物。
過濾除菌：薄膜過濾法的原理
- 適用對象：熱敏感液體（如抗生素溶液、維生素、血清）。
- 規格：通常使用 0.22 微米（μm）孔徑，足以攔截大多數細菌。
- 機制：液體在壓力作用下通過濾膜，微生物被物理攔截。
接種技術：劃線平板法與塗布平板法
- 劃線平板法：利用接種環在瓊脂表面連續劃線以稀釋細菌，旨在獲得單個菌落（純化）。
- 塗布平板法：將已知體積稀釋液均勻塗布於表面，旨在進行活菌計數（量化）。
超淨工作台與生物安全
- 超淨工作台：使用過濾器提供無菌氣流，隔絕空氣中的微生物。
- 廢物處置：受污染的培養基及器材在丟棄前必須經高壓蒸汽滅菌。
- 溢出處理：立即用強效消毒劑（如次氯酸鈉/漂白水）覆蓋並消毒。
本生燈火焰在無菌操作中的角色
- 火焰滅菌：直接灼燒金屬工具（如接種環）至紅熱以殺滅所有微生物。
- 無菌區：火焰加熱空氣產生上升氣流，防止塵埃落入容器，形成約 15cm 的無菌半徑。
- 過火 (Flaming)：將試管口或玻璃塗棒快速過火以殺滅表面雜菌。
概述無菌技術的基本原則及操作流程
- 目的：防止培養物受外界微生物污染，並防止培養中的微生物外泄感染操作者。
- 工作環境：清潔工作檯面，用 70% 酒精消毒；減少空氣擾動；開啟本生燈形成熱氣上升保護區。
- 器材處理：接種環在使用前後於火焰中灼紅滅菌；培養皿及培養基需預先高壓消毒。
- 操作動作：打開培養皿蓋時盡量傾斜、動作迅速，減少暴露時間。
- 結束程序：使用後的耗材放入生物危害袋，經高壓消毒後才棄置。
比較常見滅菌方法的原理與適用對象
- 高壓蒸汽滅菌（autoclave）：121°C、約 15 分鐘；蛋白質變性殺菌；適用於培養基、耐熱器材。
- 乾熱滅菌：熱風 160–180°C 數小時；適用於玻璃器皿、金屬工具（不可用於橡膠、塑膠）。
- 火焰灼燒：本生燈直接灼紅；快速處理接種環、鉗子等。
- 化學滅菌：用 70% 酒精、氯消毒劑或戊二醛處理工作檯面或不耐熱器材。
- 輻射滅菌：γ 射線用於預先包裝的醫療用品，如一次性注射器、培養皿。
概述微生物實驗中的安全守則
- 個人防護：穿著實驗袍、配戴手套；需要時戴口罩及護目鏡；長髮束起。
- 工作習慣：實驗期間禁止飲食、不觸摸臉部；實驗前後徹底洗手。
- 意外處理：溢出時以消毒劑覆蓋，靜待一段時間後清理；皮膚接觸培養物應立即清洗並報告。
- 廢物處置：使用過的培養物及耗材放入生物危害袋，經高壓消毒後才作最終棄置。
- 記錄與監督：實驗紀錄清晰可追溯；學生必須在老師監督下進行。
微生物與人類 其他子課題
關於本文：由 DSE 神器團隊整理，資料以香港考試及評核局（HKEAA）最新公佈為準，含歷屆考評建議引用。最後更新：2026 年 4 月。想隨時隨地溫習？下載 DSE 生物神器 App。
